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Enzymatics L6060L 说明书

更新时间：2018-04-11 点击次数：2158

货号：L6060L

品名：Taq DNA Ligase（Taq DNA连接酶）

产品描述：

使用NAD +作为辅因子，Taq DNA连接酶催化在含有相邻5'-磷酰基和3'-羟基末端的双链DNA中形成磷酸二酯键。

规格：	20,000 U
浓度：	40,000 U/ml
保存：	-25°C至-15°C
纯度（SDS-PAGE）	> 99％
活性：	400,000 U/mg
SS核酸外切酶	400 U <5.0% released
DS核酸外切酶	400 U <1.0% released
DS内切核酸酶	400 U = No conversion
大肠杆菌 DNA污染	400 U <10 copies

蛋白质来源

重组大肠杆菌菌株携带Taq DNA连接酶基因的克隆。

提供：

10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
0.1% Tween-20
50% glycerol
pH 7.5 @ 25°C

随附：

B6060 (10X Taq DNA Ligase Buffer)

10X Taq DNA Ligase Buffer (B6060)：
200 mM Tris-HCI
250 mM KCl
100 mM MgCl2
5 mM NAD
0.1% Triton X-100
pH 7.6 @ 25°C

单位定义
1单位定义为在50μl1X Taq DNA连接酶缓冲液中10分钟后加入1μg用Sma I和Sal I切割的Lambda DNA的12个碱基粘性末端的50％所需的Taq DNA连接酶的量在45℃孵育。

质量控制分析

单位表征测定
单位活性使用2倍系列稀释法测量。在1X Taq DNA连接酶反应缓冲液中进行酶批次的稀释并加入到50μL含有λHind III消化的DNA和1X Taq DNA连接酶反应缓冲液的反应中。将反应在45℃孵育10分钟，停止，并在用溴化乙锭染色的0.8％琼脂糖凝胶上分析。

SDS-Page（物理纯度评估）

将2.0μL浓缩的酶溶液加载到变性的4-20％Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝胶上，该凝胶侧翼为宽范围的MW标记和2.0μL的1：100稀释的相同酶物种。电泳后，将凝胶染色并比较样品以确定物理纯度。该测试的验收标准要求浓缩样品中污染带的总量不超过稀释样品中目的蛋白质条带的质量，确认浓缩样品的纯度大于99％。

污染测试

单链核酸外切酶活性

将含有10,000cpm放射性标记的单链DNA底物的50μL反应液和10μL在37℃下孵育4小时的酶溶液导致TCA可溶性计数的释放小于5.0％。

双链核酸外切酶活性将含有5,000cpm放射性标记的双链DNA底物和10μL酶溶液的50μl反应液在37℃下温育4小时，导致TCA可溶性计数的释放少于1.0％。

双链核酸内切酶活性将含有0.5μgpENZuC DNA和10μL酶溶液的50μL反应物在37℃下温育4小时，结果通过琼脂糖凝胶电泳测定没有肉眼可察觉地转变为带切口的环状DNA。

大肠杆菌 16S rDNA污染测试
重复5μL酶溶液样品变性，并在TaqMan qPCR测定中筛选污染性大肠杆菌基因组DNA，使用对应于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。测试的验收标准是由3个重复的无模板对照样品的平均值产生的阈值循环计数（C t）。基于无模板对照 Ct值和标准曲线数据之间的相关性，该测定的检测限为<10拷贝基因组/样品。

部分产品信息：

货号	品名	规格	浓度	品牌
N2070-10-L	ATP Solution	50 µmol	10 mM	Enzymatics
N2050-10-L	10 mM dNTP Solution Mix	100 µmol	10 mM	Enzymatics
N2010L	100 mM 75µmol dNTP Solution Set	75 µmol	100 mM	Enzymatics
N2010-A-L	100 mM dATP Solution	75 µmol	100 mM	Enzymatics
N2050L	100µmol dNTP Solution Mix	100 µmol	25 mM	Enzymatics
Y9180L	10x Uracil Cleavage System	750 Reactions	N/A	Enzymatics
P7670	2x HiFi PCR Master Mix	1 rxn	2x	Enzymatics
Y9420L	5x ER/A-Tailing Enzyme Mix	24 reactions	N/A	Enzymatics
Y9380L	E. coli Pyrophosphatase	50 U	100 U/mL	Enzymatics
Y9030L	E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein	1.5 mg	2.75 mg/ml	Enzymatics
Y9140-HC-L	End-Repair Mix (High Concentration)	75 Reactions	1 Rxn/µL	Enzymatics
Y9140-LC-L	End-Repair Mix (Low Concentration)	200 Reactions	1 Rxn/µL	Enzymatics
Y9080L	Endonuclease VIII	10,000 U	10,000 U/ml	Enzymatics
P7600L	EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-)	10,000 U	200,000 U/mL	Enzymatics
X8010L	Exonuclease I	30,000 U	20,000 U/ml	Enzymatics
X8020L	Exonuclease III	50,000 U	100,000 U/ml	Enzymatics
P7010-HC-L	Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration)	10,000 U	50,000 U/ml	Enzymatics
P7010-LC-L	Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration)	10,000 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7060L	Klenow Fragment	2,500 U	5,000 U/ml	Enzymatics
X8030L	Lambda Exonuclease	10,000 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7040L	M-MuLV Reverse Transcriptase	100,000 U	200,000 U/ml	Enzymatics
P7090L	Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-)	3,000 U	30,000 U/ml	Enzymatics
P7140-HC-L	Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration)	100,000 U	400,000 U/ml	Enzymatics
P7140-LC-L	Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration)	100,000 U	40,000 U/ml	Enzymatics
P7610L	NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions	250 Reactions	2X	Enzymatics
P7590L	Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase	500 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7460L	Poly(A) Polymerase	1,000 U	5,000 U/mL	Enzymatics
Y9260L	RecA	1.5 mg	2.0 mg/mL	Enzymatics
Y9220L	RNAse H	5,000 U	5,000 U/ml	Enzymatics
Y9240L	RNAse Inhibitor	20,000 U	40,000 U/ml	Enzymatics
L6010L	T3 DNA Ligase	900,000 U	3,000,000 U/ml	Enzymatics
L6030-LC-L	T4 DNA Ligase	150,000 U	120,000 U/ml	Enzymatics
L6030-HC-L	T4 DNA Ligase (Rapid)	240,000 U	600,000 U/ml	Enzymatics
P7080L	T4 DNA Polymerase	2,000 U	3,000 U/ml	Enzymatics
Y9130L	T4 Gene 32 Protein	1.0 mg	10 mg/mL	Enzymatics
Y9040L	T4 Polynucleotide Kinase	10,000 U	10,000 U/ml	Enzymatics
L6050L	T4 RNA Ligase 1	10,000 U	20,000 U/ml	Enzymatics
L6080L	T4 RNA Ligase 2	4,500 U	30,000 U/ml	Enzymatics
L6070L	T4 RNA Ligase 2 Truncated	500 U	5,000 U/ml	Enzymatics
L6020L	T7 DNA Ligase	900,000 U	3,000,000 U/ml	Enzymatics
P7260L	T7 DNA Polymerase	3,500 U	10,000 U/ml	Enzymatics
P7180L	T7 RNA Polymerase	50,000 U	50,000 U/ml	Enzymatics
L6060L	Taq DNA Ligase	20,000 U	40,000 U/ml	Enzymatics
P7110L	Taq DSC 2.0 DNA Polymerase	1,250 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7250L	Taq-B DNA Polymerase	10,000 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7620L	TaqIT	5,000 U	50,000 U/mL	Enzymatics
P7070L	Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT)	6,000 U	20,000 U/ml	Enzymatics
G5020L	Thermolabile UDG	500 U	1,000 U/ml	Enzymatics
Y9370L	Thermostable Pyrophosphatase	1,250 U	2,000 U/ml	Enzymatics
G5010L	Uracil DNA Glycosylase	10,000 U	2,000 U/ml	Enzymatics
P7511L	VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase	500 U	2,000 U/ml	Enzymatics
P7520L	VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase	500 U	2,000 U/ml	Enzymatics
L6030-W-L	WGS Ligase	24 Reactions	N/A	Enzymatics
P7640L	ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit	1000 Reactions	N/A	Enzymatics
P7020-HC-L	φ29 DNA Polymerase (High Concentration)	2,000 U	100,000 U/ml	Enzymatics
P7020-LC-L	φ29 DNA Polymerase (Low Concentration)	2,000 U	10,000 U/ml	Enzymatics

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