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Cytoskeleton，Inc。很高兴为药物筛选，信号转导和细胞骨架研究提供广泛的试剂盒和产品。我们专注于生产纯化蛋白质和易于使用的试剂盒，以研究生物化学和细胞过程。我们的试剂盒可用于少量样品，用于基础研究或小屏幕（Biochem Kits™），也可用于大屏幕的高通量样品（CytoDYNAMIX Screens™）。
除了我们现有的产品，我们还在产品线中为微管，微管蛋白，运动蛋白，小G蛋白效应物，GAP，GEF和其他几种蛋白提供药物筛选服务。
(Cat. # PHDG1-A) 300 Slides
产品用途包括
· 固定组织切片和组织培养细胞制剂中肌动蛋白丝的荧光染色。 注意：与许多肌动蛋白抗体不同，Acti-stain™488鬼笔环肽仅与F-肌动蛋白结合，导致低背景荧光。此外，通过Acti染色结合F-肌动蛋白在物种之间没有明显差异。
· 体外稳定荧光肌动蛋白丝的制备。
肌动蛋白染色在确定活细胞和固定细胞中细胞骨架的结构和功能方面非常有用。肌动蛋白细胞骨架在活细胞中是非常动态和不稳定的结构，但是在探测或染色肌动蛋白结构之前可以用多聚甲醛固定。
材料
鬼笔环肽是来自蘑菇伞形毒蕈的七氨基酸肽毒素，其特异性地并且以高亲和力（Kd 20nM）结合至肌动蛋白的聚合形式（F-肌动蛋白）。鬼笔环肽将肌动蛋白聚合的临界浓度降低至小于1μg/ ml，从而充当聚合增强剂。鬼笔环肽已经用专有的绿色荧光染料标记，使其可用于染色组织培养细胞和组织切片中的肌动蛋白丝（1，参见图1）和无细胞制剂。Acti-stain™488鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保留了未标记肌动蛋白的许多功能特征，包括它们与肌球蛋白相互作用的能力。Actin-stain TM 488鬼笔环肽以橙色固体形式提供。
注意：鬼笔环肽是有毒的，必须小心处理（LD50人= 2mg / Kg）。
示例结果和规格
| 图1.在瑞士3T3细胞中用Acti-stain TM 488染色的肌动蛋白应力纤维。 |
| 图2. Acti-stain™鬼笔环肽的发射和激发扫描 |
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| 用抗 - 纽蛋白（红色），Dapi（蓝色细胞核）和F-肌动蛋白染色的Swiss 3T3细胞用Acti-stain TM 488（绿色F-肌动蛋白，Cat。＃PHDG1）染色。 |
| Acti-stain TM 488的吸光度和荧光扫描。将标记的鬼笔环肽稀释到甲醇中，并分别在350-750和500-750nm之间扫描其吸光度和激发光谱。吸光度峰值在500nm处，荧光在550nm处。 |
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Acti-stain鬼笔环肽是可用的明显的鬼笔环肽。表1描述了它们对F-肌动蛋白的亮度，光稳定性，背景和亲和力常数。将这些性能特征与其他荧光鬼笔环肽进行比较，您将看到使用Acti-stain™来满足肌动蛋白染色要求的优势。
表1.荧光鬼笔环肽的生物化学特征
共轭 | 货号 | 波长（Ex / Em） | 亮度（AFU *） | 光漂白的稳定性（以秒为单位的半衰期**） | 背景 （总AFU在100nM时的百分比**） | 亲和力（Kd，纳摩尔） |
荧光毒伞素 | na | 485/535 FITC滤波器组 | 432 | 6 | 22 | 72 +/- 12 |
Acti-stain™488 | PHDG1 | 485/535 FITC滤波器组 | 832 | 57 | 五 | 55 +/- 8 |
Acti-stain™535 | PHDR1 | 535/585 TRITC滤波器组 | 430 | 27 | 12 | 36 +/- 7 |
Acti-stain™555 | PHDH1 | 535/585 TRITC滤波器组 | 551 | 46 | 16 | 63 +/- 8 |
Acti-stain™670 | PHDN1 | 640/680 Cy5滤光片组 | 332 | 8 | 18 | 50 +/- 12 |
* = AFU通过定量细胞成像测量。** =在没有抗褪色的情况下在染色的Swiss 3T3细胞中测量。
引用：
oitbak等，2011。微小RNA在神经干细胞支持内皮形态发生中的作用。血管细胞。v 3，p 25。
Yuan et al。，2012。使用同量异位标签对胺代谢物进行亚秒级绝dui定量，以发现哺乳动物细胞中的通路活化。肛门。化学。第84页，第2892-2899页。
问题1：我可以使用荧光标记的鬼笔环肽染色活细胞中的F-肌动蛋白吗？
答案1： 不幸的是，不，鬼笔环肽不能用于在活细胞中染色F-肌动蛋白。鬼笔环肽用于在固定细胞中染色F-肌动蛋白。荧光鬼笔环肽仅与F-肌动蛋白的天然四级结构结合，提供低背景。鬼笔环肽结合的正确固定条件是在PBS中的3.7％（v / v）多聚甲醛10分钟，因为它保留了鬼笔环肽的高亲和力结合所必需的季铵蛋白结构。甲醇固定破坏天然构象，因此不适合用鬼笔环肽染色F-肌动蛋白。为了监测活细胞中的肌动蛋白动力学，建议微量注射罗丹明标记的肌动蛋白（Cat。＃APHR或AR05）。有关更多信息，请参阅这些数据表。
问题2：哪种荧光标记的鬼笔环肽稳定/亮？
答案2： Acti-stains中亮和稳定的是Acti-stain 488（绿色荧光; Cat。＃PHDG1）。有关我们所有Acti-stains的更多信息，请参阅下表。
共轭 | 猫。＃ | 波长（Ex / EM） | 亮度（AFU） | 光漂白的稳定性*（1/2秒寿命） | 背景（总AFU在100 nM时的百分比） |
Acti-stain™488 | PHDG1 | 535分之485 | 832 | 57 | 五 |
Acti-stain™535 | PHDR1 | 585分之535 | 430 | 27 | 12 |
Acti-stain™555 | PHDH1 | 585分之535 | 551 | 46 | 16 |
Acti-stain™670 | PHDN1 | 六百八十零分之六百四十 | 332 | 8 | 18 |
* =在没有抗褪色的情况下测量。
货号 | 品名 | 规格 | 品牌 | |
BK165-S | Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton | |
BK165 | Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton | |
BK163-S | Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton | |
BK163 | Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton | |
BK160-S | Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton | |
BK160 | Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton | |
BK162-S | Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton | |
BK162 | Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton | |
BK161-S | Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton | |
BK161 | Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton | |
AAC04-Beads | Acetyl-Lysine Affinity Beads | ea | cytoskeleton | |
APY03-Beads | Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads | ea | cytoskeleton | |
ASM11-Beads | SUMOylation 1 Affinity Beads | ea | cytoskeleton | |
ASM24-Beads | SUMOylation 2/3 Affinity Beads | ea | cytoskeleton | |
UBA01-Beads | Ubiquitination Affinity Beads | ea | cytoskeleton | |
CIG02-Beads | Acetyl-Lysine Control Beads | ea | cytoskeleton | |
CIG03-Beads | SUMO1 IP Control Beads | ea | cytoskeleton | |
CIG01-Beads | IgG Control Beads | ea | cytoskeleton | |
CUB02-Beads | Ubiquitination Control Beads | ea | cytoskeleton | |
BLR01 | BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit | ea | cytoskeleton | |
BLR02 | BlastR™ Rapid Filtration Kit | ea | cytoskeleton | |
AAC02 | Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (7B1) | ea | cytoskeleton | |
AAC03 | Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1) | ea | cytoskeleton | |
AAC03-HRP | Acetyl Lysine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1) | ea | cytoskeleton | |
AAC01 | Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (3C6.08.20) | ea | cytoskeleton | |
APY03 | Phosphotyrosine Antibody Mouse Monoclonal (27B10) | ea | cytoskeleton | |
APY03-HRP | Phosphotyrosine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (27B10) | ea | cytoskeleton | |
ASM01 | SUMO1 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 5D8B16) | ea | cytoskeleton | |
ASM24 | SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 11G2) | ea | cytoskeleton | |
ASM23 | SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3) | ea | cytoskeleton | |
ASM23-HRP | SUMO-2/3-HRP Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3) | ea | cytoskeleton | |
AUB01 | Ubiquitin Antibody Mouse Monoclonal | ea | cytoskeleton | |
AUB01-HRP | Ubiquitin-HRP Antibody Mouse Monoclonal | ea | cytoskeleton | |
PHDG1 | Acti-stain 488 phalloidin | ea | cytoskeleton | |
PHDH1 | Acti-stain 555 phalloidin | ea | cytoskeleton | |
PHDN1 | Acti-stain 670 phalloidin | ea | cytoskeleton | |
BK001 | Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin | ea | cytoskeleton | |
BK003 | Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin | ea | cytoskeleton | |
AKL95 | Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton | |
AD99 | Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle | ea | cytoskeleton | |
AS99 | Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle | ea | cytoskeleton | |
AKL99 | Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton | |
AKF99 | Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton | |
AP05 | Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton | |
APHR | Actin protein (rhodamine): human platelet | ea | cytoskeleton | |
AR05 | Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton | |
AT01 | Alpha-actinin protein: rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton | |
RP01P | Arp2/3 protein complex: porcine brain | ea | cytoskeleton | |
CS-TFC01 | Cardiac Thin Filament Complex (CTFC) | ea | cytoskeleton | |
CF01 | Cofilin 1 protein: human recombinant | ea | cytoskeleton | |
HPG6 | Gelsolin protein: Homo sapiens recombinant | ea | cytoskeleton | |
MH01 | Heavy meromyosin protein | ea | cytoskeleton | |
CS-MH03 | Heavy Meromyosin Protein (HMM Fragment) | ea | cytoskeleton | |
CS-MYS03 | Myosin - cardiac S1 fragment | ea | cytoskeleton | |
CS-MYS04 | Myosin - skeletal muscle S1 fragment | ea | cytoskeleton | |
CS-MYS05 | Myosin - smooth muscle S1 fragment | ea | cytoskeleton | |
MY02 | Myosin II protein: rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton | |
MY03 | Myosin protein: bovine cardiac muscle | ea | cytoskeleton | |
PR02 | Profilin 1 protein: Untagged, human recombinant | ea | cytoskeleton | |
PHDR1 | Rhodamine Phalloidin | ea | cytoskeleton | |
CY-SC001 | SiR-Actin Kit | ea | cytoskeleton | |
CY-SC013 | SiR700-Actin Kit | ea | cytoskeleton | |
VCG03 | WASP protein VCA domain: GST tagged: human | ea | cytoskeleton | |
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