pnabio具有NLS的Cas9蛋白

Cas9 Protein with NLS

与引导RNA结合的Cas9蛋白比质粒或mRNA转染为CRISPR / Cas9技术提供了优势。大的好处是您可以使RNP复合物易于在体内工作。Cas9蛋白寿命短（细胞中半衰期约为24小时），因此将脱靶效应和镶嵌性降至低。您还可以通过简单的裂解分析轻松地体外测试指导RNA的活性。此外，Cas9蛋白非常稳定，与mRNA相比，活性确认要容易得多。后，由于它不需要转录或翻译，因此它在线虫，昆虫，植物和非典型模型系统等更广泛的生物中具有活性。

PNA Bio提供的Cas9蛋白与NLS偶联，可以注射/转染。

Cy3-Cas9可以很容易地富集被CRISPR / Cas9复合物转染的细胞。

体外裂解测定

将PCR产物与各种量的Cas9蛋白一起孵育并在凝胶上电泳。体外裂解测定是检查sgRNA活性的简单方法。

RNP复合体的转染

sgRNA的RNP复合体和各种Cas9蛋白通过电穿孔（Neon）或脂转染胺（LF2000）转染到NIH3T3细胞中。

注射RNP复合物

对于小鼠胚胎注射，将60ng / ul的Cas9蛋白和15ng / ul的两个sgRNA各自的RNP复合物注射到小鼠胚胎中。从幼犬中提取尾巴DNA并进行T7E1检测。灰色代表野生型，绿色代表大缺失（＃2,3,4,8），红色代表小in / del（＃5,6,7），蓝色代表纯合子。小in / del（＃9，10）。

Cas9蛋白

• 化脓性链球菌 NLS的Cas9蛋白
• 注射，转染就绪
• 通过体外裂解测定，电穿孔（作为RNP复合物）和
  每批小鼠胚胎注射验证的活性
• 标准浓度（CP01，重构为1 mg / ml）：20 ug，50 ug或200 ug（50 ug x 4）
• 高浓度（CP02和CP03，重构为5 mg / ml）：250 ug（CP02）或1 mg（CP03，250 ug x 4）
• 包装：CP01为20 ug或50 ug，CP02 / CP03为250 ug
• 建议使用CP01进行显微注射，建议使用CP02 / CP03进行电穿孔
• 也可用：D10A切口酶（CN01）和D10A / H840A dCas9（CD01）蛋白
• 如果美国东部时间下午5点之前收到订单，Cas9蛋白通常在同一天发货
• 欲了解更多，请联系我们 order@pnabio.com或单击此处。

Cas9蛋白的液体形式

• 可用量为1 mg / ml或5 mg / ml
• CP04-100：1毫克/毫升（6 uM），20 ug x 5管
• CP04-500：5毫克/毫升（30 uM），100 ug x 5管

高保真SniperCas9蛋白 

• 具有高保真度且不影响活性的Cas9蛋白变体
• 通过定向进化方法发现
• 可用1 mg / ml（CSP01）或5 mg / ml（CSP02）
• 阅读有关SniperCas9的新出版物
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• 切口酶和dCas9蛋白

• 化脓性链球菌的带有NLS的D10A Cas9切口酶蛋白（CN01和CN02）
• D10A / H840A Cas9用化脓性链球菌（CD01和CD02）的NLS裂解死亡蛋白
• 有50 ug大小（CN01 / CD01，重构为1 mg / ml）或250 ug大小（CN02 / CD02）。

Cy3-Cas9和Cy3-dCas9蛋白

• Cy3用NLS（CP06）标记的Cas9蛋白，可对转染的细胞进行分类和可视化
• 共聚焦显微镜检测荧光
• 通过体外裂解测定和细胞转染证实活性
• 提供25 ug，50 ug，100 ug或200 ug（CP06-200）
• 浓度1 mg / ml或5 mg / ml
• 也提供Cy3标记的dCas9蛋白（CD07）

Cy3-Cas9蛋白的活性通过电穿孔进入细胞，然后进行T7E1分析来确认。通过共聚焦显微镜确认荧光。