8-OHdG ELISA分析试剂盒

8-OHdG ELISA分析试剂盒仅供研究使用

灵敏度：0.59 ng / mL
动态范围：0.94 – 60 ng / mL
孵育时间：1小时
样品类型：细胞裂解液，血浆，样品基质，尿液
样品量：50μL

StressMarq在加拿大制造的产品。

分析背景

8-羟基-2-脱氧鸟苷（8-OH-dG）是由活性氧和氮对DNA的氧化破坏而产生的，并作为氧化应激的既定标志物。鸟嘌呤的羟化反应是对正常代谢过程和多种环境因素（即增加活性氧和氮种类的任何物质）的响应。8-OH-dG的水平升高与衰老过程以及许多病理状况（包括癌症，糖尿病和高血压）有关。在复杂的样品（例如血浆，细胞裂解物和组织）中，8-OH-dG可以以游离核苷的形式存在，也可以以掺入DNA的形式存在。血液进入肾脏后，游离的8-OH-dG会很容易地过滤到尿液中，而较大的DNA的片段则保留在血液中。由于血浆样品的复杂性，尿比血浆更适合用于测量游离的8-OH-dG。尿液中的8-OH-dG的尿酸水平在2.7-13 ng / mg肌酸之间，而据报道，通过LC-MS测定，血浆中游离的8-OH-dG的血浆水平在4-21 pg / ml之间。

储存和稳定性
如果在包装盒外部指示的有效日期之前按指示存放和使用组件，则该套件将按照特定的方式运行。除标准溶液外，所有试剂均在4°C下稳定，标准溶液应在-20°C下保存。为了获得存储效果，应将8-OHdG标准品等分成小份，然后适当存储。避免重复冷冻/解冻循环（10 µL标准品可以绘制三份标准曲线。

测定步骤

1. 在样品和标准稀释剂中制备标准品和样品。
2. 将50 µL准备好的标准液和样品一式三份加到适当的孔中。
3. 将50 µL稀释的抗体制剂添加到适当的孔中。
4. 用板盖盖好板，然后在室温（20-25°C）下孵育1小时。
5. 用1X洗涤缓冲液洗涤板4次。
6. 向每个孔中添加100 µL TMB底物。
7. 盖好板并在室温下于黑暗中显影该板30分钟。
8. 向每个孔中添加100 µL终止溶液。
9. 在酶标仪上于450 nm处测量吸光度。
10. 绘制标准曲线并计算样品浓度。