avidity BirA 生物素说明书
BirA 生物素-蛋白质连接酶通过 ATP 中间体(生物素 5'-腺苷酸)以高效和有针对性的方式将 d-生物素共价添加到生物素受体肽/蛋白质上。该试剂盒包含 300 µg BirA 酶,适用于需要更大规模反应或在工作中更频繁使用 BirA 生物素化反应的人员。
请注意:我们强烈建议使用 AviTag 氨基酸序列而不是其他生物素化肽序列。BirA 酶以 2 倍于天然底物 (BCCP) 的反应速率对 AviTag 序列进行生物素化,并且与使用的其他肽序列相比,其反应速率可达到一个数量级或更高。与其他多肽生物素化序列相比,AviTag™ 需要更少量的酶和更短的孵育时间,从而最大限度地减少与蛋白酶和蛋白质不稳定性相关的辅助问题。
套件作为:
BirA 生物素-蛋白质连接酶 (EC 6.3.4.15) 通过 ATP 中间体(生物素 5'-腺苷酸)以高效且有针对性的方式将 d-生物素与生物素受体肽/蛋白质共价添加。酶促生物素化蛋白质的下游应用是多种多样的、重要的和强大的。生物素-亲和素/链霉亲和素相互作用经常被用于亲和层析或蛋白质固定在表面或底物上。通过抗生物素抗体或亲和素/链霉亲和素-报告酶偶联物(-HRP、-碱性磷酸酶)或荧光探针进行蛋白质检测成为可能。生物素化 MHC 分子的多聚体形式是免疫生物学中的常用工具。
当与我们的 AviTag™ 生物素受体肽氨基酸序列结合使用时,生物素化发生的速度是天然大肠杆菌 BCCP 底物的两倍,与其他肽序列的生物素化相比,其发生率高出一个数量级或更多。因此,与其他可用序列相比,AviTag™ 序列需要更少的 BirA 酶和更短的孵育时间来完成生物素化。如果蛋白质不稳定性或蛋白酶活性是一个问题,这可能对下游的成功很重要。
我们的 BirA 酶是大肠杆菌野生型,由 birA 基因编码,并通过传统方法纯化至 99% 以上的纯度。
这种酶的其他名称包括:生物素连接酶;生物素操纵子阻遏蛋白;比拉; 生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]合成酶;生物素-[乙酰辅酶A-羧化酶]连接酶;生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]合成酶;乙酰辅酶A全羧化酶合成酶;乙酰辅酶A全羧化酶合成酶;生物素:脱羧酶连接酶;生物素全酶合成酶;HCS。
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