Biohub——起发生物热销产品

上海起发生物科技有限公司（Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.）属于B体育备用网址 （2009年成立）旗下的子公司，成立的初衷是建立上海起发生物自有品牌，打造国内z大，z全面，优质的生物试剂民族自有品牌。降低成本的同时，把好生物产业链中的国产生物试剂品质关。经过近十余年的发展，公司逐渐形成了以生物医药研发，CRO，临床诊断试剂产业为中心同时跨及农业，环保、化工，电子等多维度领域的生物试剂及相关原料供应商。产品涵盖生化，蛋白质，分子生物学，细胞，动物，化工等诸多领域。

Biohub热卖产品：

一、线性聚乙烯亚胺PEI MW40000

产品描述

BIOHUB 线性聚乙烯亚胺PEI MW40000 转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）的产品，因其较高的转染效果，已广泛应用于AAV，LV和重组蛋白等工业化生产。

聚乙烯亚胺是一种具有较高阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔两个碳原子，即每第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵"体(proton sponge)，因此，非常容易结合带负电荷的核酸分子，形成带正电荷的复合物颗粒，该颗粒与细胞表面阴离子结合，很容易通过内吞作用进入细胞；并且可抵御溶酶体的降解作用，从而提高核酸分子的表达水平。

基本信息

CAS

49553-93-7

分子式

(C2H5N)n . xHCl

分子量

40,000 (~22,000 free base)

熔点

73-75℃

溶解性

溶于冷水

不溶于

常用有机溶剂（乙醇、丙酮、四氢呋喃）

形式

白色固体粉末

生物毒性

未知

安全防护

手套，护目镜，口罩

存储

粉末至少可以保存一年， PEI内含自由氨基，建议开封后4℃干燥保存，减缓氧化过程。

运输

常温运输

特点

大量实验数据反馈，细胞通用性好，有非常好的转染效果，尤其对293，CHO细胞系有特别显著的转染效果。

配置方法

PEI 转染试剂粉末配置方法：

将 1g PEI MW40000 放入盛有 900 mL 水的玻璃烧杯中

放入搅拌转子，放置于磁力搅拌器上，设置搅拌程序以形成一个较小的漩涡

等待 PEI MW40000 完q溶解，通常需要 5 分钟左右

用 25 mL 塑料移液管加入 1 N NaOH 滴定至 pH 6.9~7.1

如果不小心超过 7.1，则使用 1N 的盐酸和新的塑料移液管将 pH 重新滴定至 6.9~7.1

将溶液转移到 1L 玻璃量筒中，加入水定容至 1L

用无菌真空过滤膜过滤配制的转染试剂溶液

按需分装，4°C 储存

配置成液体后分装在合适的瓶子中，并且保存在 4℃ 的转染试剂将可在 6 个月之内保持性能。

如仅用于蛋白定性研究，分装的转染试剂可延长有效使用期至 1 年。

转染操作流程：(贴壁细胞转染方法)

1. 接种细胞： 转染前一天，用胶原酶（BIOHUB Cat#78CL10002)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔加入的细胞量参考下图表1，一般18-24小时（sf9细胞为3-4小时）后转染。转染时细胞汇合度应至少达到 70~80%以上。转染前更换为含5%血清的生长培养基。

2. 准备 DNA-PEI 复合物： DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。用 Opti-MEM ITM或其他适合的无血清培养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。 （稀释PEI和DNA的体积为培养体积的1/10-1/20, DNA浓度为1ug/ml）

3. 转染细胞： 直接向每个孔中加入 DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。转染4-6小时（sf9细胞为2小时 )后，更换为生长培养基。

4. 孵育细胞和分析结果： 在 CO2培养箱中 37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后最快 7 h 即可检测到转入基因的表达。 请自行确定z适合检测时间。

5. 转染 24 h 后，将细胞传代至新鲜的生长培养基中（将细胞稀释 10 倍 以上），在 CO2培养箱中 37℃孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约 1~2 周可 筛选到耐药性克隆，在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

转染操作流程：(悬浮细胞转染方法)

1. 转染前准备：悬浮细胞传代接种于适量含悬浮细胞生长培养基中，合适条件下培养。根据培养瓶大小调整细胞密度（例100mL培养瓶，1X10 6 cells/mL），然后旋紧瓶口放入摇床继续培养，2~4小时后可以进行转染。

2. 准备 DNA-PEI 复合物：DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室。用 Opti-MEM ITM或其他适合的无血清培养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。

3. 转染细胞：将PEI-DNA转染复合物逐滴加入到细胞培养液中，摇匀后旋紧瓶口放回摇床合适培养条件下培养至可以分析检测。

4. 孵育细胞和分析结果：转染后一般24-72h即可检测到转入基因的表达。 请自行确定z适合检测时间。

5. 如果要获得更多的蛋白产量，有文献表明转染后24小时，可以适当稀释细胞，稀释比例参考范围（1:2—1:5）之间，可以增加蛋白产量，稀释效应与最佳稀释比率应根据经验确定。

产品背景

BIOHUB 生产的78Bio PEI是一种优化的线性阳离子聚合物转染试剂,分子量分别为 25000 和 40000，78BioPEI40000 相比 25000 转染效率高，但毒性也略大于 78PIE25000。在 HEK293 和 CHO 的蛋白表达系统中，相比于市面上的脂质体 78BioPEI 都表现出高的蛋白表达量（无 论是 96 孔板还是 100L 的细胞反应器），以及更小的细胞毒性、更高的转染效和更高的可 重复性，并且十分经济的高性价比转染试剂。产品具有以下特点：

1.转染效率高，细胞毒性低；  蛋白表达量高；

2.节约成本：BIOHUB 78 PEI转染试剂 ，进口品质，亲民价格，至少能够降 40% 的转染试剂总成本；

3.适用于 HEK293 等真核细胞的转染；

4.适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染；

5.适用于有血清和无血清的转染条件；

6. 无机试剂，无动物源成分；

7. 产品稳定，质控严格；

8. 工艺流程适用范围广，容易优化 适合小规模培养板，培养瓶到大规模的生物反应器。

产品反馈

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

3.加热或加酸都有助于 78BioPEI 溶解。当然酸可能不用加那么多，详细用量可试加一点 ,搅拌看看，足够溶解就行，不一定需要加到 pH 那么低。

4.一定要溶解充分，溶解不充分会影响后续的转染效率.

5.冷冻后可能会影响其后续转染效果。

特别提醒：初次使用 78PEI 进行不同基因转染时应先做预试，优化出适合自己实验的， 最佳 PEI 和 DNA 的比例，通常筛选范围在 1:1 到 5:1 之间，如果之前用过Polysciences品牌的 PEI，用 78BioPEI 时应适当降低使用浓度。

二、蛋白快速染色液

简介

一种特殊配方的考马斯亮蓝染液，只染蛋白不染胶。无刺激性气味高度环保，可用于ＳＤＳ-ＰＡＧＥ或非变性ＰＡＧＥ等蛋白电泳胶的快速、高灵敏染色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。对于 1.0 mm 厚度的凝胶，染色过程仅需15分钟，就可以检测到低达20ng的蛋白电泳条带，若实验对检测灵敏度有较高要求，可将凝胶放置在染色液中2小时，可达到最大灵敏度(BSA：7ng)。

l 无需固定，微波或脱色，最快10min可观测到蛋白条带

l 高灵敏度 检测下限可达7ng

l 背景清晰 过夜也不会染色过度

l 经济安全 每块胶仅需25ml染色液

l 质谱兼容 不会使蛋白甲基化或乙酰化

推荐用法

1. 电泳后的SDS-PAGE 胶取下放入容器中，加入25 ml本染色液（适用于8cm*8cm*1.5mm SDS-PAGE凝胶，按实际大小酌情增减，调整范围30-50ml）。

2. 置于摇床上摇动，2-5min 后条带开始显现，1h后可见背景清晰细小条带，染色时间可根据胶类型和检测蛋白调整（40min -过夜）均可。背景颜色基本不会随染色时间增强。

3. 染色结束后，将蛋白凝胶至于水中保存及取出拍照。因蛋白等电点不同，染料瞬时附着能力不同，建议染色 2h 以后，或者过夜，再将凝胶放入水中效果更佳。

4. 染液可以重复利用 2-3 次。随使用次数的增加，需增加染色时间。

基本参数

常见问题

注意事项

1. 染色液放置一段时间瓶底会有沉淀，使用之前请上下颠倒混匀。

2. 本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。

3. 需自备去离子水或双蒸水。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

三、优级胎牛血清 Fetal Bovine Serum（FBS, Superfine）

产品描述

胎牛血清(优级)具有j格优惠、性价比高的特点，来源清晰。适用于多种细胞的培养，如大多数动物器官细胞的培养，肿瘤细胞和癌细胞的培养，以及部分融合细胞的实验和培养。它还可用于细胞系的保存和组织器官的培养、单克隆抗体的研制、绝大多数肿瘤细胞的培养，也可用于少数干细胞的培养，如脂肪干细胞。由于其自身的特点，该产品已成为公司销量z大的产品。此材料来源于美国农业部认证的原料，和我们其他等级的原料一样经过同样的过滤方案和最终的质量控制测试。这种胎牛血清通过100nm (0.1 mm)孔径分级过滤器进行过滤。在分装之前，每批血清使用真池技术进行混合，以确保各瓶之间的均匀性和一致性。

产品特点

低内毒素，无细菌，支原体，噬菌体，病毒等污染;

无外源添加因子，不含技术，抗生素等；

产品应用

已通过本公司300多种细胞株和上百种原代细胞的验证，细胞生长速度快，状态良好。

运输与保存方法

干冰运输，-20°C冻存。

注意事项

请在2°C-8°C的环境中解冻，不宜在较高温度下进行解冻；注意：解冻温度较高会导致血清浑浊，沉淀增加，品质下降，

血清解冻过程中请不时摇匀（小心勿造成气泡），使血清成分和温度均匀，从而减少沉淀的产生。

血清解冻后应尽快用完，尽量避免反复冻融。

血清不宜在是室温中长时间放置，使用后尽快放回2°C-8°C中。

高温解冻，举例摇晃，反复冻融，放置时间过长等，请勿超过一个月。

四、ACCUTASE™ 细胞消化液

产品简介

Accutase™是包含蛋白水解酶和胶原酶活性的一种细胞消化液，是胰酶/EDTA消化液的w美替换产品，用于从常规组织培养器皿和粘附培养器皿中消化细胞。适用于组织解离和细胞分离，因分离后的细胞能保持完好的表面抗原，且不含任何动物动物或者细菌来源组分，可满足对后续如细胞表面标记、病毒生长分析、流式细胞分析以及生物反应器相关检测等多种实验的要求。

与传统的胰酶消化液相比，本品具有以下优势：

1）适用于绝大多数原代细胞和哺乳动物细胞系的消化，以及昆虫细胞；

2）温和有效的消化干细胞（hESCs和mESCs），冻存后细胞具更高复苏率；

3）几分钟内实现粘附细胞的分离，不需清洗或中和反应，节省细胞传代时间；

4）对细胞消化较为温和，能增加细胞产量和存活率；增强细胞贴壁效率；改善细胞形态和细胞生长特性等。

本品为即用型的无菌产品，溶于Dulbecco’s PBS（含0.5 mM EDTA和3 mg/L酚红），酶活性≥ 200 U/mL，可直接用于细胞培养相关实验。使用说明

1. 4 ℃或冰浴融解Accutase，之后进行分装保存。

【注】：不可37 ℃融化本品，否则会影响酶活。

2. 使用不含钙、镁的1×Dulbecco's PBS润洗细胞一次；

3. 以无菌操作的方式，按 75 cm2表面积加入10 mL的Accutase覆盖贴壁细胞；

4. 重新放入37 ℃培养箱内，消化5-10 min；

【注】：消化时间可自行调整。大部分细胞处于Accutase中高达1小时，对细胞状态无影响。

5. 消化结束后，轻轻敲击培养皿，使细胞与皿底部脱离，依照常规操作进行细胞计数和传代。

【注】：不需另做清洗和酶活终止步骤。

保存条件

冰袋运输。收到后请于-20 ℃保存，有效期2年。2~8 ℃保存，有效期2个月。

注意事项

1. Accutase™融化后4℃保存，至少2个月稳定。不可室温保存。也可分装成单次用量，放到-80 ℃冻存，有效期2年。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

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