精准细胞解离新选择：Worthington Ⅳ 型胶原蛋白酶

在生命科学研究领域，细胞解离是众多实验的关键起始步骤，从原代细胞培养到组织工程研究，都离不开高效且温和的细胞解离方法。Ⅳ 型胶原蛋白在多种组织中广泛存在，尤其是基底膜。因此，针对富含 Ⅳ 型胶原蛋白组织的细胞解离，一款优质的 Ⅳ 型胶原蛋白酶至关重要。Worthington 的 Collagenase, Type 4 凭借优异性能，有效解决了细胞解离过程中的诸多难点，成为科研人员的得力助手。作为Worthington公司的中国授权代理，上海起发强烈推荐其Collagenase, Type 4型胶原酶产品。

突破传统细胞解离难点

攻克组织特异性消化难题

不同组织的细胞外基质成分差异显著，在富含 Ⅳ 型胶原蛋白的组织，如肾脏、肺脏等的基底膜以及一些肿瘤组织中，实现高效消化且不损伤细胞并非易事。传统的酶解方法往往缺乏特异性，容易对细胞造成过度损伤，影响细胞的生物学特性。Worthington 的 Ⅳ 型胶原蛋白酶对 Ⅳ 型胶原蛋白具有高度特异性，能够精准识别并切割 Ⅳ 型胶原蛋白的特定肽键。这一特性使得在处理富含 Ⅳ 型胶原蛋白的组织时，它能够高效地分解细胞外基质，将细胞从组织中解离出来，同时很大程度地保护细胞的完整性和活性。例如，在肾脏组织的解离实验中，该酶能够在温和的条件下，快速且准确地切断 Ⅳ 型胶原蛋白的连接，释放出高活性的肾细胞，为肾脏疾病研究、药物筛选等实验提供了优质的细胞样本。

消化效率与细胞损伤平衡的精妙把握

在细胞解离过程中，消化效率与细胞损伤之间的平衡是一个关键挑战。消化时间过长或酶浓度过高，虽能提高消化效率，但会对细胞造成不可逆的损伤，影响细胞的后续功能；而消化时间过短或酶量不足，则无法实现细胞的有效分离。Worthington 的 Ⅳ 型胶原蛋白酶通过优化的酶活性配方和作用机制，在保证高效消化的同时，显著降低对细胞的损伤。其酶切动力学特性经过精心设计，使得在较短的消化时间内，就能实现细胞的充分解离。实验表明，使用该酶进行细胞解离，细胞在解离后能够迅速恢复正常的生理功能，存活率高，为后续的细胞培养、细胞生物学研究等提供了良好的基础。

产品优势

• 低胰蛋白酶活性：保护细胞完整性

Collagenase, Type 4的核心优势在于其极低的胰蛋白酶活性。这种特性使其在细胞分离过程中能够有效减少对细胞膜蛋白和受体的损伤，从而更好地保留细胞的完整性和功能。这对于胰岛细胞分离等对细胞活性要求很高的实验尤为重要。

• 高效的胶原降解能力

Collagenase, Type 4源自Clostridium histolyticum，是一种高效的基质金属蛋白酶（MMPs）和锌肽酶。它能够特异性地降解IV型和VII型胶原蛋白，这些是基底膜的主要成分。其高效的胶原降解能力使其在组织解离和细胞分离中表现出色，尤其是在处理胰岛细胞、软骨等组织时。

订购信息

品名：4型胶原酶（Collagenase Type 4）

货号：LS004188（1g规格）、LS004186（100mg规格）

产品形式：透析后的冻干粉末

储存条件：2~8℃保存，避光防潮，密闭干燥

溶解与保存：Collagenase, Type 4为冻干粉，可在2-8℃下保存。溶解时需使用TESCA缓冲液（50 mM TES, 0.36 mM氯化钙，pH 7.4），溶解后可分装于-20℃冻存。

工作浓度：通常使用0.1-5 mg/mL的浓度进行组织消化，反应时间根据组织类型和实验需求调整。

使用方法

（一）溶液配制

溶解：根据实验需求，将Collagenase, Type 4溶解于无菌的缓冲液中（如Hanks平衡盐溶液或PBS）。推荐浓度为1-2mg/ml。

过滤：使用0.22µm滤膜过滤，去除杂质和可能的微生物污染。

储存：配制好的溶液可在4°C下保存，建议在24小时内使用。

（二）细胞分离步骤

组织处理：

将组织样本清洗干净，去除血迹和杂质。

将组织切成小块（约1-2mm³），放入含有Collagenase, Type4溶液的离心管中。

消化：

在37°C水浴或培养箱中进行消化，消化时间根据组织类型和细胞类型而定，通常为30分钟至2小时。

消化过程中可轻轻摇晃离心管，以促进酶与组织的接触。

终止消化：

消化完成后，加入适量的终止液（如含10%胎牛血清的培养基）终止反应。

通过离心（1000rpm，5分钟）收集细胞。

细胞洗涤与培养：

用培养基洗涤细胞，去除残留的酶。

将细胞悬液接种到培养皿或培养瓶中，进行后续培养。

广泛应用，助力科研

1. 胰岛细胞分离

Collagenase, Type 4常用于胰岛细胞的分离。由于其低胰蛋白酶活性，能够有效减少对细胞膜蛋白和受体的损伤，从而更好地保留细胞的完整性和功能。

2. 肿瘤组织处理

该酶可用于消化富含胶原蛋白的肿瘤组织，如乳腺癌、结直肠癌和胰腺癌等。通过将肿瘤组织解离为单个细胞或小细胞团，可进行细胞计数、细胞周期分析、基因表达检测等实验，同时也有助于建立肿瘤细胞系。

3. 原代细胞分离

Collagenase, Type 4适用于多种原代细胞的分离，例如：

肾细胞：从肾脏组织中分离肾小管细胞或肾小球细胞，用于肾脏疾病模型研究。

软骨细胞：从软骨组织中分离软骨细胞，用于软骨修复或再生研究。

髓系细胞：用于制备髓系细胞，研究其在免疫系统中的功能。

4. 组织工程与再生医学

在组织工程中，Collagenase, Type 4可用于处理天然组织，去除细胞成分后保留细胞外基质作为支架材料。例如，在人工皮肤构建中，该酶可去除皮肤细胞，保留细胞外基质作为支架，用于种植皮肤细胞。

5. 细胞外基质研究

该酶能够特异性降解胶原蛋白，适用于细胞外基质的降解与分析，帮助研究其组成和功能。

6. 其他应用

消化肠系膜脂肪组织：作为磷酸盐缓冲生理盐水的补充剂，用于消化已切除的肠系膜脂肪组织。

消化睾丸组织：用于消化去被膜的睾丸，制备相关细胞。

子宫内膜组织消化：用于消化子宫内膜组织，研究其细胞功能。

Worthington是一家创始于1947年，位于美国新泽西州的生产高纯度酶类及相关生化药剂的世界顶尖公司。Worthington通过ISO9001认证，致力于为客户提供优质的产品及服务。供应的生物药剂主要纯化于牛胰腺、植物、发酵产物及其他自然资源，Worthington专长的蛋白提取与纯化技术保证了其所提供酶类拥有与其提取来源物中同等的生物活性，从而保证了研究结果的可靠性和稳定性。目前Worthington提供的产品覆盖细胞分离消化酶、DNA酶、RNA酶等几乎所有生命科学研究领域。其产品适用于单细胞测序，流式细胞分选，细胞治疗等领域的细胞分离、疫苗生产和生物制品加工。

Worthington的Collagenase, Type 4凭借其高效、温和的特性，成为细胞分离和组织解离领域的理想选择，广泛应用于生命科学研究的多个方向。