在基因治疗、细胞治疗以及基础生物学研究领域,病毒载体作为一种重要的基因递送工具,其转导效率的高低直接影响着实验的成败与治疗效果。然而,提高病毒载体转导效率并同时确保细胞的健康与功能,一直是科研人员面临的重大挑战。AlstemBio 的 ViralBoost Reagent 应运而生,凭借其配方与性能,成功攻克这些难点,为科研与临床应用带来新的曙光。作为AlstemBio公司的中国授权代理,上海起发强烈推荐其ViralBoost Reagent产品。
直击传统病毒载体转导痛点
转导效率提升难题的有效攻克
传统的病毒载体转导过程中,病毒与细胞表面的结合效率有限,且部分病毒在进入细胞后可能面临内体逃逸障碍等问题,导致大量病毒无法有效将基因递送至细胞核,从而使得转导效率低下。ViralBoost Reagent 通过特殊的分子机制,能够显著增强病毒载体与细胞表面受体的结合能力。它含有特定的功能性分子,这些分子可以与细胞表面的某些蛋白或糖基化位点相互作用,引导病毒载体更精准地锚定在细胞表面,增加病毒与细胞的接触机会。同时,该试剂还能协助病毒突破内体逃逸的障碍,促进病毒基因组从内体中释放并进入细胞核,从而大幅提高了病毒载体的转导效率。多项实验数据表明,使用 ViralBoost Reagent 后,慢病毒、腺病毒等常见病毒载体对多种细胞系的转导效率可提升数倍甚至数十倍,为基因治疗和细胞治疗提供了更强大的基因递送保障。
细胞毒性与细胞功能影响难题的精妙解决
在尝试提高病毒载体转导效率的过程中,一些辅助试剂或处理方法往往会对细胞产生毒性,影响细胞的正常生长、代谢和功能,甚至导致细胞死亡。这对于需要维持细胞活性和功能完整性的实验和治疗应用来说是一个严重的问题。AlstemBio 的 ViralBoost Reagent 采用温和且生物相容性良好的配方,在显著提升转导效率的同时,对细胞的毒性极小。经过严格的细胞毒性测试,在有效提升转导效率的浓度范围内,细胞的存活率、增殖能力以及关键生物学功能均未受到明显影响。例如,在对干细胞进行基因转导时,使用 ViralBoost Reagent 不仅能够高效地将目的基因导入干细胞,而且干细胞依然能够保持其多能性和分化潜能,为干细胞治疗相关研究提供了可靠的技术支持。
产品优势
★ 显著提高病毒产量
ViralBoost Reagent是一种新型的小分子混合物,能够在转录水平上稳定调节病毒RNA的包装,从而显著提高逆转录病毒和慢病毒颗粒的产量,最高可达10倍。这一特性使其成为高滴度病毒生产的理想选择。
★ 广泛的适用性
无论是逆转录病毒还是慢病毒,ViralBoost Reagent都能有效增强其包装效率。其广泛的适用性使其适用于多种病毒系统和细胞类型,包括HEK 293T细胞等常用细胞系。
★ 低成本,高效益
通过显著提高病毒颗粒的产量,ViralBoost Reagent帮助实验室在不增加成本的情况下实现高滴度病毒生产。这不仅节省了时间和资源,还提高了实验的整体效率。
★ 简单易用
ViralBoost Reagent的操作流程非常简便。在转染HEK 293T细胞后6-14小时,只需将ViralBoost Reagent以1/500的体积比例加入新鲜培养基中,即可继续培养。这种简单的实验方案使其适合各种规模的病毒包装实验。
★ 稳定的性能
每一批次的ViralBoost Reagent都经过严格的功能测试,确保其在病毒包装中的高效性和稳定性。产品在4℃下可稳定保存12个月。
订购信息
ViralBoost Reagent是一种新型的小分子混合物,专门用于高滴度病毒生产。它通过在转录水平上稳定调节病毒RNA的包装,显著提高逆转录病毒或慢病毒颗粒的产量,最高可达10倍。
品名:ViralBoost Reagent(VB100)
货号:VB100
规格:1 ml
浓度:500X
储存温度:4°C
稳定性:在4°C条件下保存,有效期为12个月。
相关产品推荐
• Lentiviral Packaging Mix(VP100):用于慢病毒包装。
• Lentivirus Precipitation Solution(VC100):用于慢病毒浓缩。
• NanoFect Transfection Reagent(NF100):用于高效基因转染。
使用方法
以下是使用ViralBoost Reagent进行病毒包装的典型流程:
1.第一天:细胞铺板
用1x明胶涂布培养皿或平板30分钟。吸出明胶,每100 mm平板接种约3-4×10⁶个HEK 293T细胞。每个平板使用10 ml培养基。
注意:确保细胞悬液分散均匀,避免细胞聚集。
2.第二天:转染
准备两个试管,分别加入0.5 ml DMEM。
在一个试管中加入病毒载体和包装混合物的DNA,轻敲试管使其充分混合。
在另一个试管中加入NanoFect转染试剂(货号NF100),轻敲试管混合。
将NanoFect-DMEM混合物转移到DNA管中,上下吸移2-3次,涡旋5-10秒,充分混合。
在室温下孵育15分钟,使NanoFect/DNA复合物自组装。
将NanoFect/DNA混合物滴加到平板中,轻轻摇动平板并放回培养箱。
3.第三天:更换培养基并添加ViralBoost
吸出上清液,用10 ml新鲜培养基替换,并加入20 µl ViralBoost Reagent(500X)。
将平板放回细胞培养箱。
4.第四天:收集病毒
小心收集上清液至50 ml离心管中,置于冰上。
在4°C下,以1000×g离心10分钟,去除细胞碎片。
使用0.45 µm过滤器过滤上清液,并将过滤后的上清液转移至无菌容器中。
按照每4体积病毒上清液加入1体积的冷逆转录病毒/慢病毒沉淀溶液(货号VC100或VC200)进行浓缩。
5.第五天:浓缩病毒
在4°C下,以1500×g离心30分钟。
离心后,病毒颗粒可能在容器底部形成米色或白色沉淀。
丢弃上清液,用1500×g离心5分钟去除残留液体。
用冷的无菌PBS或DMEM以原始体积的1/10至1/100重悬病毒沉淀,分装至低温小瓶中,并在-80°C下保存。
6.注意事项
使用前确保试剂充分溶解并混合均匀。
操作过程中需小心处理病毒材料,避免溢出。使用漂白剂对危险液体进行消毒(终浓度为10%,持续30分钟)。
仅用于研究目的,不得用于诊断或治疗程序。
基因治疗中具体应用
在基因治疗领域,病毒载体的高效生产是实现临床应用和商业化的重要环节。然而,传统的病毒载体生产方法往往面临产量低、成本高、工艺复杂等问题。alstemBio的ViralBoost Reagent(VB100)通过显著提高病毒载体的产量和滴度,为基因治疗提供了强大的助41力。
1. 显著提高病毒载体产量
ViralBoost Reagent是一种新型的小分子混合物,能够在转录水平上稳定调节病毒RNA的包装,从而显著提高逆转录病毒和慢病毒颗粒的产量,最高可达10倍。这对于基因治疗中常用的病毒载体(如AAV、LV等)的生产具有重要意义。例如,在HEK 293T细胞中使用ViralBoost Reagent后,GFP慢病毒和逆转录病毒的转导效率显著提升,流式细胞术数据显示病毒颗粒产量大幅提升。
2. 优化病毒载体生产效率
基因治疗中常用的病毒载体(如AAV)在生产过程中常面临内质网应激(ER stress)和未折叠蛋白响应(UPR)等问题,这些问题会限制病毒载体的产量。ViralBoost Reagent通过调节病毒RNA的包装,能够有效缓解这些问题,从而提高病毒载体的生产效率。
3. 降低生产成本
通过显著提高病毒载体的产量,ViralBoost Reagent能够有效降低基因治疗药物的生产成本。这对于基因治疗的商业化和大规模应用至关重要。例如,传统的AAV载体生产方法通常只能达到10⁸-10¹¹ VG/mL的滴度,而使用ViralBoost Reagent后,滴度可显著提高。
4. 广泛的适用
ViralBoost Reagent适用于多种病毒载体的生产,包括逆转录病毒、慢病毒和腺相关病毒(AAV)。这种广泛的适用性使其成为基因治疗研究和生产的理想选择,能够满足不同实验室和应用场景的需求。
5. 简化操作流程
ViralBoost Reagent的操作流程非常简便。在转染HEK 293T细胞后6-14小时,只需将ViralBoost Reagent以1/500的体积比例加入新鲜培养基中即可。这种简单的操作流程不仅节省了时间和人力,还减少了因操作复杂导致的误差。
6. 支持基因治疗的临床应用
在基因治疗的临床应用中,高滴度的病毒载体是实现有效基因递送的关键。ViralBoost Reagent通过提高病毒载体的产量和滴度,能够更好地满足临床试验和商业化生产的需求。例如,在AAV载体的生产中,使用ViralBoost Reagent后,病毒基因组滴度和包装效率显著提高,这对于需要高剂量病毒载体的基因治疗项目尤为重要。
ALSTEM Bio 是一家成立于2012年的创新型生物技术公司,总部位于美国旧金山湾区。公司专注于诱导多能干细胞(iPSC)重编程技术、干细胞诱导和基因编辑相关产品的开发,并提供定制化服务。未来ALSTEM Bio 将继续致力于开发创新的干细胞研究工具和基因编辑技术,推动再生医学和个性化医疗的发展
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